发光细菌检测污水生物毒性原理（发光细菌水质生物毒性检测标准）

发光细菌法作为水质生物毒性检测方法之一，被广泛应用在水污染监测中，也是商品化应用最好的生物毒性技术。本篇具体介绍一下发光细菌检测污水生物毒性原理及标准。

发光细菌检测污水生物毒性原理：

水样在一定的时间和条件下与发光细菌接触后，发光细菌的发光强度与水样中毒性组分总浓度呈负相关关系，通过生物发光光度计测定水样与发光细菌接触15min后的发光抑制率来表征水样的急性毒性水平。发光细菌的生物发光反应是由于分子氧作用，细胞内荧光酶催化将还原态的黄素单核苷酸及长链脂肪醛氧化为黄素单核苷酸及长链脂肪酸，并释放出最大发光强度在490nm处的蓝绿光。生物毒性的表征指标为相对发光强度或抑光率，相对发光强度是测试样本发光值与控制样本发光值对比后所得，结果以百分比表示。

发光细菌水质生物毒性检测标准：

目前，市面上应用最广泛的发光细菌有３种：明亮发光杆菌、费氏弧菌、青海弧菌，如图１所示。其中，明亮发光杆菌和费氏弧菌为海洋菌，青海弧菌为我国发现的淡水菌。ZnSO－4·7H2O对３种菌种的EC50（单一化学物质使抑光率达到50%时该物质的浓度）最小的为费氏弧菌，费氏弧菌的灵敏度更高。

下表列出了明亮发光杆菌(P.phosphoreum)以及费氏弧菌(Vibriofischeri)等所涉的国内外标准。ISO11348的３个标准，主要区别在于费氏弧菌的状态不同：第１标准采用的是新鲜制备的费氏弧菌；第２标准采用的是液体干细菌；第３标准采用是冻干粉细菌。其中，ISO11348-3-2017是应用最广泛的国际标准。涉及青海弧菌的暂时没有标准，仅在《水和废水监测分析方法》第四版书籍中提到。

ISO11348-3-2017与GB15441—1995相比，主要有以下两点区别。

（1）利用的发光菌不同，且保存菌种的温度不同，前者用的是费氏弧菌，保存温度为-20℃；后者为明亮发光细菌，保存温度为２～５℃；因此，对于需要长期保存的冻干粉而言，冷冻温度越低越好。

（2）前者要求测定加入水样前发光细菌的原始荧光强度，并根据对照试样做出校正，避免了细菌样品不均匀带来的误差影响。

发光细菌监测水质生物毒性的标准：