【行业标准】发光细菌水质生物毒性检测的评价标准

国家海洋局《污水生物毒性监测技术规程发光细菌急性毒性测试－费歇尔弧菌法》提到，样品毒性水平的表征方法采用检测结果中的15min发光抑制率Ｈ进行评价。根据Ｈ大小将毒性等级分为３级，相应等级分别为低度毒性风险、中度毒性风险、高度毒性风险，分级方法如表所示。

表１污水样品毒性风险等级评价方法

中科院土壤研究所制订的水质毒性分级标准中，根据相对发光率的大小将毒性等级分为低毒、中毒、重毒、高毒、剧毒５个等级，如表所示。

表２水质急性毒性分级标准

目前，市面上应用广泛的发光细菌有３种：明亮发光杆菌、费希尔弧菌、青海弧菌。其中，明亮发光杆菌和费希尔弧菌为海洋菌，青海弧菌为我国发现的淡水菌。ZnSO－4·7H2O对３种菌种的EC50（单一化学物质使抑光率达到50%时该物质的浓度）小的为费希尔弧菌，费希尔弧菌的灵敏度更高。

明亮发光杆菌(P.phosphoreum)以及费希尔弧菌(Vibriofischeri)等所涉的国内外标准。ISO11348的３个标准，主要区别在于费希尔弧菌的状态不同：第１标准采用的是新鲜制备的费希尔弧菌；第２标准采用的是液体干细菌；第３标准采用是冻干粉细菌。其中，ISO11348-3-2017是应用最广泛的发光细菌生物毒性检测国际标准。涉及青海弧菌的暂时没有标准，仅在《水和废水监测分析方法》第四版书籍中提到。

ISO11348-3-2017与GB15441—1995相比，主要有以下两点区别：

1.利用的发光细菌不同，且保存菌种的温度不同，前者用的是费希尔弧菌，保存温度为-20℃；后者为明亮发光细菌，保存温度为2~5℃。因此，对于需要长期保存的冻干粉而言，冷冻温度越低越好。

2.前者要求测定加入水样前发光细菌的原始荧光强度，并根据对照试样做出校正，避免了细菌样品不均匀带来的误差影响。